Elektroforesis gel adalah salah satu metode utama yang digunakan dalam biologi molekuler untuk analisis DNA.Metode ini melibatkan migrasi fragmen DNA melalui gel, kemudian dipisahkan berdasarkan ukuran atau bentuk.Namun, pernahkah Anda menemukan kesalahan selama percobaan elektroforesis, misalnya ada garis-garis yang tercoreng pada gel agarosa, atau tidak ada garis-garis pada gel?Apa penyebab kesalahan ini?
Teknisi kami telah merangkum beberapa pemecahan masalah di sini untuk referensi Anda.
1. Oleskan pita pada gel agarosa
●DNAnya terdegradasi.Hindari kontaminasi nuklease.
● Buffer elektroforesis tidak segar.Setelah penggunaan buffer elektroforesis berulang kali, kekuatan ionik menurun, dan nilai pH-nya meningkat, sehingga kapasitas buffer melemah, yang mempengaruhi efek elektroforesis.Disarankan untuk sering mengganti buffer elektroforesis.
● Kondisi elektroforesis yang digunakan tidak tepat.Jangan biarkan volumetage melebihi 20 V/cm, dan pertahankan suhu <30° C selama elektroforesis.Untuk elektroforesis untai DNA raksasa, suhu harus <15° C. Periksa apakah buffer elektroforesis memiliki kapasitas buffer yang cukup.
● Terlalu banyak DNA yang dimasukkan ke dalam gel.Mengurangi jumlah DNA.
● Terlalu banyak garam dalam DNA.Gunakan pengendapan etanol untuk menghilangkan kelebihan garam terlebih dahulu.
● DNA terkontaminasi dengan protein.Gunakan ekstraksi fenol untuk menghilangkan protein secara lanjutan.
● DNA mengalami denaturasi.Jangan memanaskan sebelum elektroforesis.Encerkan DNA dalam buffer dengan 20 mM NaCl.
2. Anomali migrasi pita DNA
● Renaturasi situs COS pada fragmen λHind III.Panaskan DNA selama 5 menit pada suhu 65°C sebelum elektroforesis, lalu dinginkan dalam unit es selama 5 menit.
● Kondisi elektroforesis yang digunakan tidak tepat.Jangan biarkan volumetage melebihi 20 V/cm, dan pertahankan suhu <30° C selama elektroforesis.Periksa buffer elektroforesis memiliki kapasitas buffer yang cukup.
● DNA mengalami denaturasi.Jangan memanaskan sebelum elektroforesis.Encerkan DNA dalam buffer dengan 20 mM NaCl.
3. Pita DNA samar atau tidak ada pada gel agarosa
● Jumlah atau konsentrasi DNA yang dimuat pada gel tidak mencukupi.Meningkatkan jumlah DNA.Elektroforesis gel poliakrilamida sedikit lebih sensitif dibandingkan elektroforesis agarosa, dan pemuatan sampel dapat dikurangi dengan tepat.
● DNA terdegradasi.Hindari kontaminasi nuklease.
● DNA dielektroforesis dari gel.Elektroforesis gel dalam waktu yang lebih singkat, gunakan tegangan yang lebih rendah, atau gunakan gel dengan persentase yang lebih tinggi.
● Sumber cahaya W yang tidak tepat digunakan untuk visualisasi DNA yang diwarnai dengan etidium bromida.Gunakan cahaya W dengan panjang gelombang pendek (254 nm) untuk sensitivitas yang lebih besar.
4. Pita DNA hilang
●DNA berukuran kecil dielektroforesis dari gel.Elektroforesis gel dalam waktu yang lebih singkat, gunakan tegangan yang lebih rendah, atau gunakan gel dengan persentase yang lebih tinggi.
● Sulit membedakan pita DNA molekul sejenis.Tingkatkan waktu elektroforesis, dan periksa konsentrasinyagel untuk memastikan persentase gel yang akan digunakan benar.
● DNA mengalami denaturasi.Jangan memanaskan sebelum elektroforesis.Encerkan DNA dalam buffer dengan 20 mM NaCl.
● Untaian DNA sangat besar, dan elektroforesis gel konvensional tidak cocok.Analisis pada elektroforesis gel pulsa.Masalah apa lagi yang Anda alami dengan elektroforesis gel agarosa?Kami akan meneliti lebih lanjut untuk panduan di masa depan.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) adalah perusahaan khusus yang berfokus pada produk terkait elektroforesis di Cina.Kisahnya dimulai pada tahun 1970 ketika Tiongkok belum memasuki masa reformasi dan keterbukaan.Melalui perkembangan bertahun-tahun, Liuyi Bitotech memiliki merek sendiri yang dikenal dengan Merek Liuyi di pasar domestik untuk produk elektroforesis.
Merek Liuyi memiliki sejarah lebih dari 50 tahun di Tiongkok dan perusahaan tersebut dapat menyediakan produk yang stabil dan berkualitas tinggi di seluruh dunia.Melalui pengembangan bertahun-tahun, ini layak menjadi pilihan Anda!
Sel elektroforesis horizontal (tangki/ruang) Liuyi Biotech berkualitas tinggi dengan tampilan bagus.Dengan ukuran baki gel yang berbeda, baki tersebut dapat memenuhi kebutuhan eksperimental Anda yang berbeda.Kami memiliki tim teknis dan pabrik kami sendiri.Dari desain hingga manufaktur, bahan mentah hingga bagian-bagian penting, kami dapat mengontrol keseluruhan proses.Seri DYCP 31 untuk elektroforesis DNA, yang merupakan modelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, DanDYCP-31E.Perbedaannya terletak pada ukuran gel dan harga.Kami menyediakan produk ukuran penuh untuk pelanggan kami.ModelDYCP-32Cdapat membuat gel terbesar 250mm * 250mm.
Sementara itu, kami merekomendasikan catu daya elektroforesis kamiDYY-6C,DYY-6DDanDYY-10Cuntuk sel elektroforesis kami (tangki/ruangan) seri DYCP-31 dan 32.
Jika Anda ingin informasi lebih lanjut tentang produk, silakan kunjungi situs web ini untuk mendapatkan lebih banyak, dan selamat datang untuk menghubungi kami melalui email untuk memberi tahu kami apa yang Anda inginkan, dan lihat apakah kami dapat memberikan solusi untuk Anda.
Untuk informasi lebih lanjut tentang kami, silakan hubungi kami melalui email[dilindungi email], [dilindungi email].
Waktu posting: 09-Mei-2022