Masalah Umum Elektroforesis DNA

Elektroforesis gel adalah salah satu metode utama yang digunakan dalam biologi molekuler untuk analisis DNA.Metode ini melibatkan migrasi fragmen DNA melalui gel, di mana mereka dipisahkan berdasarkan ukuran atau bentuk.Namun, apakah Anda pernah mengalami kesalahan selama percobaan elektroforesis Anda, seperti pita dioleskan pada gel agarosa, atau tidak ada pita pada gel?Apa yang bisa menjadi penyebab kesalahan ini?

mengganggu

Teknisi kami telah merangkum beberapa pemecahan masalah di sini untuk referensi Anda.

1. Pita yang dioleskan pada gel agarosa

pita dioleskan pada gel

DNA-nya terdegradasi.Menghindari kontaminasi nuklease.

● Buffer elektroforesis tidak segar.Setelah penggunaan buffer elektroforesis berulang kali, kekuatan ionik menurun, dan nilai pH-nya meningkat, sehingga kapasitas buffer melemah, yang mempengaruhi efek elektroforesis.Disarankan untuk sering mengganti buffer elektroforesis.

● Kondisi elektroforesis yang digunakan tidak tepat.Jangan biarkan tegangan melebihi 20 V/cm, dan pertahankan suhu <30° C selama elektroforesis.Untuk elektroforesis untai DNA raksasa, suhu harus <15 ° C. Periksa buffer elektroforesis memiliki kapasitas buffer yang cukup.

● Terlalu banyak DNA yang dimuat pada gel.Kurangi jumlah DNA.

● Terlalu banyak garam dalam DNA.Gunakan presipitasi etanol untuk menghilangkan kelebihan garam di tingkat lanjut.

● DNA terkontaminasi dengan protein.Gunakan ekstraksi fenol untuk menghilangkan protein di tingkat lanjut.

● DNA didenaturasi.Jangan panaskan sebelum elektroforesis.Encerkan DNA dalam buffer dengan 20 mM NaCl.

2. Anomali migrasi pita DNA

● Renaturasi situs COS dari fragmen Hind III.Panaskan DNA selama 5 menit di bawah 65 ° C sebelum elektroforesis, lalu dinginkan di atas unit es selama 5 menit.

● Kondisi elektroforesis yang digunakan tidak tepat.Jangan biarkan tegangan melebihi 20 V/cm, dan pertahankan suhu <30° C selama elektroforesis.Periksa buffer elektroforesis memiliki kapasitas buffer yang cukup.

● DNA didenaturasi.Jangan panaskan sebelum elektroforesis.Encerkan DNA dalam buffer dengan 20 mM NaCl.

3. Pita DNA samar atau tidak ada pada gel agarosa

pita DNA samar

● Jumlah atau konsentrasi DNA yang dimuat pada gel tidak mencukupi.Meningkatkan jumlah DNA.Elektroforesis gel poliakrilamida sedikit lebih sensitif daripada elektroforesis agarosa, dan pemuatan sampel dapat dikurangi dengan tepat.

● DNA terdegradasi.Menghindari kontaminasi nuklease.

● DNA dielektroforesis dari gel.Elektroforesis gel untuk waktu yang lebih singkat, gunakan voltase yang lebih rendah, atau gunakan gel dengan persentase yang lebih tinggi.

● Sumber cahaya W yang tidak tepat digunakan untuk visualisasi DNA yang diwarnai dengan etidium bromida.Gunakan cahaya W dengan panjang gelombang pendek (254 nm) untuk sensitivitas yang lebih besar.

4. Pita DNA hilang

DNA ukuran kecil dielektroforesis dari gel.Elektroforesis gel untuk waktu yang lebih singkat, gunakan voltase yang lebih rendah, atau gunakan gel dengan persentase yang lebih tinggi.

● Sulit untuk membedakan pita DNA dari molekul yang sama.Tingkatkan waktu elektroforesis, dan periksa konsentrasinyadari gel untuk memastikan benar persen gel yang akan digunakan.

● DNA didenaturasi.Jangan panaskan sebelum elektroforesis.Encerkan DNA dalam buffer dengan 20 mM NaCl.

● Untaian DNA sangat besar, dan elektroforesis gel konvensional tidak cocok.Analisis pada elektroforesis gel pulsa.Apa masalah lain yang Anda alami dengan elektroforesis gel agarosa?Kami akan meneliti lebih lanjut untuk panduan di masa depan.

Beijing Liuyi bioteknologi Co, Ltd (Liuyi Biotech) adalah perusahaan khusus yang berfokus pada produk terkait elektroforesis di Cina.Kisahnya dimulai pada tahun 1970 ketika China belum memasuki masa reformasi dan keterbukaan.Melalui pengembangan bertahun-tahun, Liuyi Bitotech memiliki merek sendiri, yang dikenal sebagai Merek Liuyi di pasar domestik untuk produk elektroforesis.

Merek Liuyi memiliki sejarah lebih dari 50 tahun di China dan perusahaan dapat menyediakan produk yang stabil dan berkualitas tinggi di seluruh dunia.Melalui pengembangan bertahun-tahun, itu layak menjadi pilihan Anda!

Sel elektroforesis horizontal (tangki/ruang) dari Liuyi Biotech berkualitas tinggi dengan penampilan yang baik.Dengan ukuran baki gel yang berbeda, mereka dapat memenuhi persyaratan eksperimental Anda yang berbeda.Kami memiliki tim teknis dan pabrik kami sendiri.Dari desain hingga pembuatan, bahan baku hingga bagian-bagian penting, kami dapat mengontrol seluruh proses.Seri DYCP 31 adalah untuk elektroforesis DNA, yang merupakan modelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, danDYCP-31E.Perbedaan di antaranya adalah ukuran dan harga gel.Kami menyediakan ukuran penuh produk untuk pelanggan kami.ModelDYCP-32Cdapat membuat gel terbesar 250mm * 250mm.

1-1

Sementara itu, kami merekomendasikan catu daya elektroforesis kamiDYY-6C,DYY-6DdanDYY-10Cuntuk sel elektroforesis kami (tangki/ruang) seri DYCP-31 dan 32.

1-4

Jika Anda ingin informasi lebih lanjut tentang produk, silakan kunjungi situs web ini untuk mendapatkan lebih banyak, dan selamat datang untuk menghubungi kami melalui email untuk memberi tahu kami apa yang Anda inginkan, dan lihat apakah kami dapat memberikan solusi untuk Anda.

Untuk informasi lebih lanjut tentang kami, silahkan hubungi kami melalui email[email protected], [email protected]


Waktu posting: Mei-09-2022