Perkenalan
Elektroforesis gel adalah teknik dasar dalam biologi molekuler, yang banyak digunakan untuk pemisahan protein, asam nukleat, dan makromolekul lainnya. Kontrol yang tepat terhadap volume sampel, voltase, dan waktu elektroforesis sangat penting untuk mencapai hasil yang akurat dan dapat direproduksi.Rekan lab kami menawarkanpraktik terbaik untuk mengelola parameter ini selama elektroforesis gel SDS-PAGE.
Produk elektroforesis gel Bioteknologi Liuyi Beijing
Volume Sampel: Memastikan Konsistensi
Saat melakukan elektroforesis SDS-PAGE, volume sampel merupakan faktor kunci yang dapat berdampak signifikan terhadap resolusi hasil Anda. Umumnya disarankan untuk memuat 10 µL total protein per sumur. Untuk memastikan konsistensi dan mencegah penyebaran sampel antara sumur yang berdekatan, penting untuk memuat buffer pemuatan 1x dengan volume yang sama di setiap sumur kosong. Tindakan pencegahan ini membantu mencegah penyebaran sampel ke jalur sekitar, yang dapat terjadi jika sumur dibiarkan kosong.
Sebelum memuat sampel Anda, selalu mulai dengan menambahkan penanda berat molekul ke salah satu sumur. Hal ini memungkinkan identifikasi ukuran protein dengan mudah setelah elektroforesis.
Kontrol Tegangan: Menyeimbangkan Kecepatan dan Resolusi
Tegangan yang diterapkan selama elektroforesis secara langsung mempengaruhi kecepatan migrasi sampel melalui gel dan resolusi pemisahan. Untuk SDS-PAGE, disarankan untuk memulai dengan tegangan rendah sekitar 80V. Tegangan rendah awal ini memungkinkan sampel bermigrasi secara perlahan dan merata, mengkonsentrasikannya dalam pita tajam saat memasuki gel pemisah.
Setelah sampel telah sepenuhnya memasuki gel pemisah, tegangan dapat ditingkatkan menjadi 120V. Tegangan yang lebih tinggi ini mempercepat migrasi, memastikan bahwa protein dipisahkan secara efisien sesuai dengan berat molekulnya. Penting untuk memantau kemajuan bagian depan pewarna biru bromofenol, yang menunjukkan selesainya elektroforesis. Untuk gel dengan konsentrasi 10-12%, biasanya 80-90 menit sudah cukup; namun, untuk gel 15%, Anda mungkin perlu sedikit memperpanjang masa pakainya.
Manajemen Waktu: Mengetahui Kapan Harus Berhenti
Waktu adalah faktor penting lainnya dalam elektroforesis gel. Menjalankan gel terlalu lama atau terlalu pendek dapat menyebabkan pemisahan yang kurang optimal. Migrasi pewarna biru bromofenol merupakan indikator yang berguna: ketika pewarna mencapai dasar gel, biasanya sudah waktunya untuk menghentikan proses tersebut. Untuk gel standar, seperti 10-12%, durasi elektroforesis sekitar 80-90 menit biasanya sudah cukup. Untuk gel dengan persentase lebih tinggi, misalnya 15%, waktu proses harus diperpanjang untuk memastikan pemisahan protein secara sempurna.
Manajemen Buffer: Menggunakan Kembali dan Mempersiapkan Buffer
Buffer elektroforesis dapat digunakan kembali 1-2 kali, tergantung kondisi spesifik laboratorium Anda. Namun untuk hasil yang optimal, disarankan untuk menyiapkan buffer segar 10x dan mengencerkannya sesaat sebelum digunakan. Hal ini memastikan bahwa buffer mempertahankan efektivitasnya, sehingga menghasilkan hasil elektroforesis yang lebih andal.
Produk elektroforesis gel Bioteknologi Liuyi Beijing
Dengan mengontrol volume sampel, tegangan, dan waktu elektroforesis secara hati-hati, Anda dapat meningkatkan akurasi dan reproduktifitas hasil elektroforesis gel secara signifikan. Menerapkan praktik terbaik ini dalam pekerjaan laboratorium Anda akan membantu Anda mencapai pita yang lebih jelas dan berbeda, sehingga menghasilkan data yang lebih baik untuk analisis hilir.
Jika Anda memiliki metode yang lebih baik untuk mengoptimalkan percobaan elektroforesis gel, selamat datang untuk berdiskusi dengan kami!
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) memiliki spesialisasi dalam pembuatan instrumen elektroforesis selama lebih dari 50 tahun dengan tim teknis profesional dan pusat R&D kami sendiri. Kami memiliki lini produksi yang andal dan lengkap mulai dari desain hingga inspeksi, dan gudang, serta dukungan pemasaran. Produk utama kami adalah Sel Elektroforesis (tangki/ruang), Catu Daya Elektroforesis, Transilluminator LED Biru, Transilluminator UV, Sistem Gambar & Analisis Gel, dll. Kami juga menyediakan instrumen lab seperti instrumen PCR, mixer pusaran, dan centrifuge untuk laboratorium.
Jika Anda memiliki rencana pembelian produk kami, jangan ragu untuk menghubungi kami. Anda dapat mengirimkan pesan kepada kami melalui email[dilindungi email]atau[dilindungi email], atau silakan hubungi kami di +86 15810650221 atau tambahkan Whatsapp +86 15810650221, atau Wechat: 15810650221.
Silakan Pindai kode QR untuk menambahkan di Whatsapp atau WeChat.
Waktu posting: 20 Agustus-2024